藥典 | 亞硝胺新通則USP <1469> 自12月1日起正式實施

美國藥典通則<1469> NITROSAMINE IMPURITIES（以下稱通則）于2021年12月1日正式實施。該通則為亞硝胺雜質(zhì)的控制提供了一種基于科學(xué)和風(fēng)險的方法，對原料藥和制劑中潛存的亞硝胺雜質(zhì)進(jìn)行有效的識別、評估并控制。通則主要提供了兩方面的建議：

a) 建立亞硝胺的控制限度，確保這類雜質(zhì)的減少或消除；

b) 提供了用于監(jiān)測亞硝胺水平的分析方法及方法的驗證要求。

亞硝胺類雜質(zhì)屬于高毒性基因毒類雜質(zhì)，它可以通過多種途徑被引入到醫(yī)藥產(chǎn)品中或作為雜質(zhì)產(chǎn)生。它的反應(yīng)機(jī)理主要是，在酸性條件下，仲胺或叔胺與亞硝酸鹽（后者通過中間降解）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成亞硝胺。通則中給出了仲胺形成亞硝胺的化學(xué)反應(yīng)示意圖如下：

通則適用于七種亞硝胺的評估，包括：N-亞硝基二甲胺（NDMA）、N-亞硝基二乙胺（NDEA）、N-亞硝基二異丙胺（NDIPA）、N-亞硝基乙基異丙胺（NEIPA）、N-亞硝基二丁胺（NDBA）、N-亞硝基甲基苯胺（NMPA）和N-亞硝基甲基氨基丁酸（NMBA）。該清單與 FDA 亞硝胺雜質(zhì)指南中的亞硝胺清單完全一致。如果出現(xiàn)上述列舉之外的亞硝胺雜質(zhì)，生產(chǎn)商需基于其毒性數(shù)據(jù)設(shè)定限度，并與監(jiān)管當(dāng)局確認(rèn)。

根據(jù)經(jīng)驗或文獻(xiàn)報道，通則總結(jié)出亞硝胺的主要幾個來源：

在特定條件下以及存在某些試劑、溶劑、原材料和加工助劑的情況下進(jìn)行原料藥加工。

藥物本身，在某些條件下可能降解，從而形成亞硝胺（如雷尼替丁）。

導(dǎo)致二烷基胺形成的溶劑（如二甲基甲酰胺[DMF]）降解。

原材料、溶劑（包括回收溶劑）、試劑或催化劑中的雜質(zhì)。

用于制備起始材料或中間體的材料和中間體、試劑和溶劑中的雜質(zhì)。

成品生產(chǎn)過程中使用的水、輔料或加工助劑中的雜質(zhì)。

在某些反應(yīng)條件下以及存在形成亞硝胺所需的必要前體的情況下，在藥品制造過程中。

成品藥容器封閉系統(tǒng)中的雜質(zhì)，可能包括能夠形成亞硝胺的雜質(zhì)，尤其是與含有胺的材料和亞硝化劑的潛在來源（例如亞硝酸鹽、硝化纖維素）有關(guān)的雜質(zhì)。

與FDA及其他官方對亞硝胺雜質(zhì)的控制思路一致，通則要求對潛在的亞硝胺雜質(zhì)進(jìn)行風(fēng)險評估，充分考慮引入亞硝胺的所有潛在來源，包括原料藥、賦形劑、水、溶劑、制造工藝、包裝成分和配方穩(wěn)定性。

通則指出，7種已知的亞硝胺雜質(zhì)具有潛在的和已確定的毒性，沒有治療價值。USP遵循FDA亞硝胺雜質(zhì)控制指南中對這7種亞硝胺限度的設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。NDMA 和 NMBA 的可接受攝入量（AI）為 96 ng/day，NDEA、NMPA、NIPEA 和 NDIPA 的可接受攝入量（AI）為 26.5 ng/day。再根據(jù)藥品標(biāo)簽上原料藥（DS）的最大日劑量（MDD，

如果在一種制劑或原料藥中同時檢測到多個亞硝胺雜質(zhì)，且按最大日劑量（MDD）算得總的亞硝胺水平超過26.5ng/day，生產(chǎn)商需與監(jiān)管當(dāng)局確認(rèn)合適的可接受攝入量（AI）限度。

由于亞硝胺類雜質(zhì)每日允許暴露量非常低，只有納克級別，所以就要求使用特別靈敏的分析方法來進(jìn)行亞硝胺的檢測。在大部分情況下推薦使用高靈敏度高選擇性的色譜分離技術(shù)聯(lián)合質(zhì)譜進(jìn)行定量檢測（例如，HPLC-MS/MS，GC-MS/MS）。

適當(dāng)?shù)臉悠分苽湓诤哿侩s質(zhì)分析中非常關(guān)鍵。不恰當(dāng)?shù)臉悠分苽涑绦蚩赡苋藶閷?dǎo)致亞硝胺雜質(zhì)的生成或損失。對于亞硝胺雜質(zhì)的分析方法驗證的要求，如果是定量分析方法，驗證建議包括范圍、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、中間精密度和定量限。如果是限度測試，則要包括專屬性、回收率、可檢測性和溶液穩(wěn)定性。

為了幫助供應(yīng)商更好地檢測亞硝胺雜質(zhì)，通則提出了四種定量的分析方法（見8.1 Quantitative Procedures）。對于這四種定量分析方法，只需要做藥典方法的確認(rèn)。

對于限度測試，該通則中未提供方法，只給出一個樣品制備程序（見8.2 Limit Test Procedures）。更多詳細(xì)信息，請參見USP <1469> NITROSAMINE IMPURITIES。